Faasikontrastmikroskoopia on günekoloogias asendamatu diagnostiline protseduur, mis hõlbustab oluliselt emakakaela lima (emakakaela lima) ja tupe sekretsiooni (tupevedelik) elutähtsate rakkude uurimist. Lisaks võimaldab see protseduur hinnata ka järgmist: sperma (seemnerakud).
Näidustused (kasutusvaldkonnad)
- Diagnostika tupefloora - tupefloora (tupefloora) uurimisel on faasikontrastmikroskoopia abil võimalikud järgmised uuringud: näiteks bakterite koloniseerimise puudumise või normaalse tupefloora diagnoosimine (piimhape bakterid) koos tsütolüüsiga või ilma (rakkude hävitamine) saab teha selle diagnostilise protseduuri abil. Lisaks on võimalik tuvastada bakterid preparaadis ja liigitada nad liikumatute ja liikuvate bakterite rühmadesse. Lisaks saab faasikontrastmikroskoobi abil usaldusväärselt tuvastada parasiitide rühma kuuluvad lipukesed nagu Trichomonas vaginalis. Lisaks on mükoosid (seenhaigused) saab faasikontrastmikroskoopias usaldusväärselt tuvastada, nii et soomükoosi diagnoosi saab määrata faasikontrastmikroskoopia abil. Nendele diagnostilistele võimalustele tuginedes on emakakaela nakkusliku steriilsuse põhjuse tuvastamine tavaliselt võimalik.
- Põletikulised markerid - faasikontrastmikroskoopia abil nende arv ja tüüp leukotsüüdid (leukotsüütide morfoloogia) saab määrata.
- Tsükli faasi määramine - tupe tsütoloogiat kasutatakse menstruaaltsükli tsükli faaside määramiseks. Selles uurimisetapis uuritakse mikroskoopiliselt tupe (tupe) pindmisi (pindmisi) rakke. Rakuhinnang annab teavet naise praeguse menstruaaltsükli faasi kohta. Naiste tsükkel on jagatud kaheks faasiks, esimest faasi nimetatakse follikulaarseks faasiks (munaraku küpsemise faas) ja teist tsükli faasi nimetatakse kollaskeha faasiks (korpus luteumfaas). Siiski tuleb märkida, et tsükli faaside määramine faasikontrastmikroskoopia abil on nüüd suures osas asendatud hormoondiagnostikaga, mis tagab kõrge diagnostilise kindluse.
- Sims-Huhneri test - seda testiprotseduuri, mida nimetatakse ka post-koitaalseks testiks, kasutatakse selleks, et teha kindlaks, kas sperma (seemnerakud) võivad tungida emakakaela limasse (emakakaela lima), et jõuda viljastumiskohani.
- Hinnang sperma - lisaks spermatosoidide emakakaela limasse tungimise (läbimise) võimekuse hindamisele saab faasikontrastmikroskoopia abil lisaks uurida spermatosoidide arvu, nende liikuvust ja morfoloogiat (välimust).
- Määrdumine - kahtluse korral, näiteks mükoos (seenhaigus), on võimalik tupe (tupe) või häbeme (naise väliste primaarsete suguelundite kogu) määrimine. See koosneb huule ja kliitor) või võib-olla päraku piirkonnast mikroskoopiliselt võtta ja hinnata.
Faasikontrastmikroskoobi valmistamine, kasutades olemasoleva tupe sekretsiooni hindamise näidet:
- Faasikontrastmikroskoobi abil tupe sekretsiooni hindamise alguses valmistati kaks sobivat natiivset preparaati (värske, fikseerimata, tavaliselt värvimata kehavedelikud, elusate patogeenide mikroskoopiliseks avastamiseks kudede või elundite sisu).
- Lisamine kaalium hüdroksiidilahus (KOH) ja lauasool tupe sekretsioonini. Pärast segamise lõppu kantakse kombineeritud sekretsioon slaidile ja kaetakse katteklaasiga. Seejärel saab teha faasikontrastmikroskoopilise hindamise.
Protseduur
Faasikontrastmikroskoopia põhimõte põhineb valguskiirte häirimisel mikroskoobi kiirteel, mis võimaldab saavutada värvimata rakkude suure kontrastsusega pildi. Faasikontrastmikroskoobi struktuur ja funktsioon:
- Rõngakujuline ava, kondensaator, rõngakujuline faasiplaat ja objektiiv on eriti olulised faasikontrastmikroskoobi toimimiseks. Sisestades rõngakujulise ava kondensaatorisse ja faasiplaadi objektiivi, põhjustatakse murdumata ja murdunud valguskiirte eraldamine. Sellest tulenev difraktsiooniga valguskiirte lainepikkuse viivitus põhjustab faaside erinevuse, mis muudab optiliselt struktuuri detailid uuritavatest mikroskoopilistest objektidest tunduvad ümbritsevast keskkonnast tumedamad. Füüsiliselt faas vereliistakute teisendada faasi või tee erinevused amplituudi erinevusteks. Nende amplituudierinevuste tagajärjel ilmub objekti kujutis mikroskoobis objekti läbivate ja objektil difraktsioonis olevate otseste valguskiirte vastastikuse tühistamise või võimendamise teel.
- Seega on selle põhimõtte puuduseks asjaolu, et ideaalsed faasipreparaadid ei ole reegel, kuna amplituudiefektid on tavaliselt faasiefektide peal.
- Lähtudes struktuuride pildistamise amplituudi erinevustest, on olemasolevad rakustruktuurid kujutatud hallide toonidena, sõltuvalt nende enda optilistest Tihedus. Konstruktsioonide reprodutseerimise, õhukeste preparaatide ja faasi kasutamise parandamiseks vereliistakute on näidatud. Olenevalt eri faasi olemusest vereliistakute, on võimalik saavutada nii positiivseid kui ka negatiivseid faasikontraste, mille tulemusel muudetakse huvipakkuvad objektid ümbritsevast tumedamaks või heledamaks.
- Faasikontrastmikroskoopias on oluline ka seda tähele panna nekroos (rakkude surm) võib valguse käes viibimise ja elutähtsate rakkude täiendava kahjustamise tõttu tekkida suhteliselt kiiresti. Selle kiire tulemusena nekroos Slaidide hindamine tuleb slaidide hindamiseks läbi viia ühe kuni kahe tunni jooksul kehtivus diagnostilise meetme Seega nõuab see elutähtsate isendite hindamise ajapiirang tavaliselt dokumenteerimist mikrofotograafia abil või vajadusel mikrokinematograafia abil. Fotomikrograaf on foto mikroskoopilisest pildist, mis on tehtud mikroskoobi külge kinnitatud kaameraga. Mikrokinematograafia kaudu on võimalus liikuvate piltide abil mikroskoopilise vaatluse all olevaid objekte jäädvustada.
Faasikontrastmikroskoopia eelised:
- Kohene diagnostika - aja kokkuhoid ja teostamine on odav.
- Suhteliselt lihtne teostada ning seetõttu kiiresti õpetatav ja õpitav.
- Sõltuvalt suhteliselt hea tundlikkusega uurijate kogemustest (haigestunud patsientide protsent, kellel haigus tuvastatakse protseduuri rakendamisel, st positiivne tulemus) ja spetsiifilisusest (tõenäosus, et tegelikult terved inimesed, kes ei kannata kõnealune haigus on ka protseduuri käigus tervislik)
- Diagnoos on teostatav ilma kõrvalise abita (st ilma kolmanda osapoole laborita).
