Külmutatud sektsiooni analüüs | Histoloogia

Külmutatud sektsiooni analüüs

See on vajalik, kui kirurg vajab protseduuri kulgu otsustamiseks teavet operatsiooni käigus eemaldatud koe kohta. Näiteks eemaldatakse kasvajast väike pahaloomuline kasvaja neer. Nüüd on vaja teha kiire sisselõige, et näha, kas kasvaja on täielikult eemaldatud või kas koeproovide servades on endiselt tohutul hulgal pahaloomulisi kudesid.

Lõpuks määrab külmutatud sektsiooni uuringu tulemus operatsiooni käigu ja patsiendi edasise teraapiaplaani. Kuidas külmutatud sektsiooni eksam töötab? 10 minuti jooksul stabiliseeritakse kude külmutades temperatuuril -20 ° C, seejärel tehakse nn mikrotoomile 5–10 μm paksune sisselõige. See asetatakse slaidile, väikesele klaasplaadile ja värvitakse kiiresti. Lõpuks uuritakse leide mikroskoobi all ja tulemuse saab kohe operatsioonisaali edastada.

Värvimismeetodid

Viimase 120 aasta jooksul on välja töötatud palju histoloogilisi värvimismeetodeid. Rakustruktuurid ja koed jagunevad värvainete värvireaktsiooni põhjal basofiilseteks, atsetofiilseteks ja neutrofiilseteks rakkudeks. Lisaks on olemas ka agyrofiilsed ja nukleofiilsed struktuurid.

Basofiilsed värvivad kõike, mis sisaldab happerühma ja mida värvitakse aluselise värvainega (näiteks hematoksüliin või metüleensinine). Atsidofiilsed struktuurid on aluselised ja neid saab seetõttu värvida erosiooni või happelise fuksiiniga (happelised värvained). Nende hulka kuuluvad tsütoplasma ja kollageen kiud.

Neutrofiilsed või lipofiilsed komponendid ei saa reageerida ei happelise ega aluselise värvainega ja seetõttu ei saa neid värvida. Agyrofiilsed komponendid võivad siduda hõbeioone ja muuta need elementaarseks hõbedaks. Nukleofiilne (tuum = rakutuum, rakutuuma armastav) värvusreaktsioon tuleneb nukleofiilsetest värvainetest rakutuumNeed on DNA-d siduvad või aluselised ained, mis seonduvad nukleiinhapetega.

Tänapäeval on hästi katsetatud keemilisi värvimismeetodeid täiendatud immunoloogiliste meetoditega. Antigeeni-antikeha reaktsiooni kasutatakse selles tehnikas raku teatud omaduste tuvastamiseks. Seejärel saab reaktsiooni keeruka tehnika abil nähtavaks teha.

Sageli kasutatavad värvimismeetodid on: HE värvimine = värvimine hematoksüliin-eosiiniga: looduslik värvaine hematoksüliin värvib sinise värvusega kõik struktuurid, mis on basofiilsed (= alust armastavad) ja seetõttu happelised, näiteks DNA, rakutuumad, ribosoomidjne. Eosiini toodetakse seevastu sünteetiliselt. Eosiin värvib kõik rakustruktuurid punaseks, kui need on atsetofiilsed (= hapet armastavad) või aluselised.

. valgud tsütoplasma, mitokondridja kollageen on nende hulgas. Azani värvimine: see koosneb mõlema värvi esimestest tähtedest, asokarmiin G-st ja aniliinsinisest kuldsest oranžist. rakutuum ja lihaskiud punased ning tsütoplasma punakas. Kollageen ja retikulaarsed kiud muutuvad sellel värvimisel siniseks.

Värvimiseks kasutatakse Giemsa plekki (Giemsa Azure-Eosin-Metylene Blue) veri raku määrded. Rakutuumi saab hõlpsasti ära tunda lillaka värvuse reaktsiooni järgi. Tsütoplasma värvub sinakaks.

Elastika värvimisel (resortsinool-fuksiin-orseiin) on kõik elastsed kiud kujutatud must-violetsena. Van Giesoni värvimismeetodit iseloomustab asjaolu, et värvimine viiakse kõigepealt läbi hematoksüliiniga. Seejärel kasutatakse pikriinhapet fuksiini (mikrofütsiini) või pikriinhappe tiasiini.

Lõpuks paistavad rakutuumad must-tumepruunid, tsütoplasma näib pigem helepruun. Vastandvärvimine pikrhappe tiasiiniga värvib elastseid kiude ja lihaskoe oranžikaskollast ning kollageenkiud punast. Massik-Goldneri järgi trikroomvärvimisel on värvimismeetodi kõige olulisem tegur värvimolekuli suurus.

Kasutatakse raua hematoksiliini, tavaliselt koos kolme täiendava värvainega, nimelt happerebane, apelsin G ja heleroheline. See värvib kollageenselt sidekoe ja lima roheline, rakutuumad sinimustad, tsütoplasma punased, lihased kahvatupunased ja punased veri lahtrid (erütrotsüüdid) oranžikaspunane. Lisaks on Grami värvimine, mis aitab eristada bakterid.

Gram-positiivne bakterid värvitakse sinisena ja gramnegatiivsed bakterid värvitakse punaseks. Samuti kasutatakse Ziehl-Neelseni värvimist bakterid, nimelt need, mis on happekindlad ja näiteks näitavad Tuberkuloosi patogeenid punasega. Muud värvimismeetodid, mida siin tuleks mainida, on Berliini-Sinise reaktsioon, mis vastutab kolmevalentsete rauaioonide tuvastamise eest koelõikudes, ja raua hematoksüliiniga värvimise meetod vastavalt Heidenhainile.