Üksik-geen analüüs on suunatud geneetilise testimise meetod.
Selle protseduuri raames, kui kahtlustatakse pärilikku haigust, mille käivitab üksik muutus a geen, uuritakse põhjuslikuna kahtlustatavat geeni. Seda tehakse sageli ka sõeluuringute osana.
Näidustused (kasutusvaldkonnad)
- Monogeensete haiguste diagnoosimine nt tsüstiline fibroos.
Protseduur
Vajalik materjal
- Hepariini veri (vähemalt 1-2 ml)
Patsiendi ettevalmistamine
- Pole vajalik
Häirivad tegurid
- Pole teada
Labori meetod
Kõige sagedamini on ühegeen analüüs on Sangeri meetod, mida nimetatakse ka ahela lõpetamise sünteesiks, kus kõigepealt tuleb uurida DNA eraldamist veri. Siis kõik vesinik sidemed, mis aitavad kaheahelalist DNA koos hoida, on katki. Pärast ühe minuti vältel kuumutamist temperatuuril 94–96 ° C on kaks üksikut ahelat. Järgmisena toimub nn praimeri hübridisatsioon, mille abil kinnitatakse praimer. See toimub umbes 60 ° C juures. Praimer on oligonukleotiid (vähestest nukleotiididest koosnevad oligomeerid), mis on lähtepunktiks DNA replikatsioonil ensüümide nagu näiteks DNA polümeraas. Pärast praimeri hübridisatsiooni toimub pikendamine, mille käigus temperatuur tõstetakse 72 ° C-ni. See võimaldab praimeril kinnituda DNA polümeraasi külge (ensüümide mis sünteesivad DNA-d). Keskmiselt pärast 30 tsüklit saab protseduuri peatada.
Edasise analüüsi viib läbi kapillaar elektroforees automatiseeritud sekvenaatorites. Tulemust nimetatakse elektroferogrammiks. See näitab erinevaid värve, mis näitavad alusjärjestust.
Selle meetodi abil saab tuvastada mutatsioonid, mis hõlmavad ainult ühte geenisisest nukleiinalust, tuntud ka kui punktmutatsioonid.
