Immunoelektroforees kasutatakse monoklonaalse laboratoorseks diagnostikaks antikehade patsiendil veri. Monoklonaalne antikehade on saadud samast rakust ja on suunatud samade antigeenide vastu. Sel põhjusel peetakse neid patoloogilisteks ja kui need avastatakse, viitavad need sellistele haigustele nagu Waldenströmi tõbi.
Mis on immunoelektroforees?
Immunoelektroforees kasutatakse monoklonaalse laboratoorseks diagnostikaks antikehade patsiendil veri. Ioonidel on diferentsiaalne liikuvus. See diferentsiaalne liikuvus on elektrofereesimeetodite alus. Need meetodid eraldavad erinevad ained üksteisest, kasutades elektrivälju ja raskusjõudu. Üks valdkonnas tuntud meetod on immunoelektroferees. See on kvalitatiivne diagnostiline protseduur, mida kasutatakse avastamiseks monoklonaalsed antikehad. Antikehad on konkreetse rakuliini immunoloogiliselt aktiivsed valgulised ained. Monoklonaalsed antikehad kõik pärinevad samast B-lümfotsüüdist ja on vastavalt suunatud ühe epitoobi vastu. Igasugune loomulik immuunvastus sissetungivate antigeenide vastu vastab polüklonaalsele reaktsioonile ja on seega suunatud erinevate epitoopide vastu. Monoklonaalne immuunvastus annab seega tõendeid keha patoloogiliste protsesside kohta. Monoklonaalsed antikehad köita erinev molekulid kõrge spetsiifilisusega. Selle seondumise saab tuvastada immunoelektroforees. Meetod on kvalitatiivne laboridiagnostiline protseduur ja see koosneb kahest protseduuri tüübist, seerumi elektroforeesist ja immunodiffussioonist.
Funktsioon, mõju ja eesmärgid
Immunoelektroforees ühendab seerumi elektroforeesi metoodika immunodiffusiooniga. Patsiendi seerum asetatakse agaroosgeelile või tselluloosatsetaatkilele. Kasutatakse ka kontrollseerumit. Rakendamisele järgneb proovide elektroforeetiline eraldamine. Antiseerumid, IgG, IgA, IgM, äädikhape normaalse elektroforeesi jaoks kasutatakse eraldusjoonte vahele kappa ja lambda. See loob reaktsiooni patsiendi seerumi antikehadega, mis tekitab sadestumisjooni. Sõltuvalt kasutatud antiseerumist ning üksikute joonte asukohast ja kujust võib teha järeldusi immunoglobuliinid koos kappa või lambda kergetega. Lambda riba korral on antikehade vabad kerged ahelad. Kasutades haruldasi IgE ja IgD, annab labor täiendavaid tõendeid, mis võimaldavad selle täpset määramist immunoglobuliinid. Immunodiffusioonelektroforeesi protseduur toimub Pierre Grabari ja Curtis Williamsi järgi ning see vastab agaroosgeeli elektroforeesi kombinatsioonile. valgud ja antikeha difusioon. Esiteks toimub agaroosgeeli elektroforees. Seejärel difundeeruvad sisalduvad antikehad antigeenide ribade vastu ja põhjustavad seeläbi kaaride sadestumist. Seda tuleks eristada Laurelli raketi immunoelektroforeesist, mis vastab elektroforeesile valgud agaroosgeelis, millest igaüks sisaldab spetsiifiliselt antikehi kontsentratsioon. Geel sisaldab kergelt aluselist puhvrit, mis võimaldab migreeruda ainult antigeenidel, surudes suurema osa antikehadest isoelektrilisse punkti, mõjutades veidi aluselist pH-d, kuni need lakkavad elektroforeetiliselt liikumast. Raketi immunoelektroforeesi alguses on antigeeni liiga palju, mistõttu moodustuvad lahustuvad antigeeni-antikeha kompleksid. Elektroforeesi ajal toimub antigeenide ja täiendavate antikehade vahel täiendav seondumine. Samaväärsuspunktis moodustuvad sel viisil immunosademed, mis sarnanevad raketitaoliste kujudega, mille kõrgus on antigeeniga proportsionaalne kontsentratsioon. Analüüsi hindamiseks mõõdetakse sademe kõrgus.
Riskid, kõrvaltoimed ja ohud
Monoklonaalsete antikehade tuvastamine on eriti oluline hulgimüeloomi ja Waldenstromi tõve diagnoosimisel. Saadud avastamine viitab immuunrakkude pahaloomulisele degeneratsioonile. Hulgimüeloom vastab a vähk Euroopa luuüdi mida iseloomustab antikehi tootvate rakkude pahaloomuline proliferatsioon plasmas. Need plasmarakud toodavad antikehi ja nende fragmente. Pahaloomulised plasmarakud pärinevad alati ühisest eellasrakust ja on seega geneetiliselt identsed. Nad toodavad eranditult monoklonaalseid antikehi. Selle haiguse pahaloomuline kasvaja võib vastata vähieelsele staadiumile, kuid võib jõuda ka väga pahaloomulise staadiumini, mis on ilma ravita kiiresti surmav. Haiguse sümptomid tulenevad rakkude pahaloomulisest kasvust või antikehadest ja antikehafragmentidest. Kõige tavalisemate sümptomite hulka kuuluvad luu valu, luude lahustumine ja spontaansed luumurrud. Kaltsium tasemed veri on sageli kõrgendatud. Lisaks paiknevad ebanormaalsed antikehad sageli kudedes ja põhjustavad elundite talitlushäireid, mis võivad viima sellistele ilmingutele nagu neer ebaõnnestumine või verevoolu halvenemine. Waldströmi tõbi on ka pahaloomuline kasvajahaigus. Täpsemalt öeldes on see pahaloomuline lümfoom haigus, mis liigitatakse aeglaselt progresseeruvaks ja peaaegu asümptomaatiliseksHodgkini lümfoom. Enamikul juhtudel on haiguses võimalik tuvastada monoklonaalse IgM ebanormaalset produktsiooni, mis on tingitud pahaloomulise lümfoom rakke. Waldenströmi tõbi on oma omaduste poolest äärmiselt sarnane hulgimüeloomiga, kuid näitab tavaliselt soodsamat kulgu. Enamik Waldenströmi tõvega patsiente on kuni diagnoosimiseni enamasti asümptomaatilised. Teistel patsientidel ilmnevad varased sümptomid, näiteks mittespetsiifilised väsimus või perifeersed neuropaatiad, mis tulenevad monoklonaalse IgM sadestumisest müeliini kest. Isegi väikesed IgM kogused võivad põhjustada polüneuropaatia. Teistel patsientidel polüneuropaatia ei esine isegi kõrge taseme korral. Lisaks mittespetsiifilised sümptomid nagu palavik, soovimatu kaalulangusvõi võib esineda öine higistamine. Luuvalu on samuti iseloomulik. IgM-i ületootmise tõttu muutub veri hüperviskoosseks, mistõttu ülaltoodud sümptomeid võib seostada hüperviskoossuse sündroomi sümptomitega. See verejooksu kalduvus avaldub enamikul juhtudel sageli ninaverejooks, peavalu, üldine halb enesetunne või hägune nägemine ja akustilised kaebused. Seda tüüpi pahaloomuliste kasvajate avastamiseks on immunoelektroferees juba ammu muutunud standardseks diagnostiliseks protseduuriks.
