Protseduur
Kui tehakse otsene Coombsi test, siis punane veri rakud filtreeritakse patsiendi verest välja. Tuleb katsetada, kas neid on antikehade IgG tüüpi neile, mis põhjustavad hemolüütilist aneemiat või veri grupi kokkusobimatus kehas. Coombsi seerum sisaldab antikehade inimese IgG antikehade vastu.
Segu kuumutatakse (inkubeeritakse) kauem. Kui on antikehade punasel veri rakud, nad klompuvad kokku ja test on positiivne. Kaudne Coombsi test koosneb kahest osast.
Eesmärk on määrata antikehad, mis on vabalt veres ja pole vererakkudega seotud. Seekord filtreeritakse vedel osa (seerum) patsiendi verest. Kõigepealt lisatakse testi jaoks seerumisse punaseid vereliblesid.
Kui seerumis on vabu antikehi, seonduvad need punaste verelibledega. Seda reaktsiooni pole näha. Ainult teises etapis, nagu otsese Coombsi testi puhul, lisatakse ja kuumutatakse Coombsi seerumit inimese antikehade vastaste antikehadega. Kui tulemus on positiivne, aglutineerub ka lahus.
Hindamine
Antikehade kombineerimisel sobiva Coomsi seerumiga seonduvad seerumi antikehad (vere vedel osa) patsiendi antikehadega. Antikehad on Y-kujulise struktuuriga, mis tähendab, et nad suudavad alati siduda kahte sidumispartnerit ja seovad seega punaseid vereliblesid omavahel. Selle tulemuseks on vererakkude suur kogunemine.
Need tükid muutuvad nähtavaks - veri aglutineerub (klompideks) ja test on positiivne. Kui patsiendil pole antikehi, jääb seerum vedelaks. Muutusi pole näha - test on negatiivne.
Millised on alternatiivid?
Alternatiiv Coombsi test on immunoloogiline ELISA protseduur (ensüümiga seotud immunosorbenttest), mille käigus teatud antikehad on märgistatud ensüümiga. See antikeha lisatakse testlahusele. Kui märgistatud antikehad reageerivad testlahuse antikehadega, aktiveeritakse seotud ensüüm ja tekib värv.
Vastavad katseklaasid muudavad värvi - test on positiivne. Lisaks ELISA protseduurile on olemas ka WESTERN-Blot, mida kasutatakse sageli positiivse ELISA testina.
