Eelistamisdiagnostika pakub naise geneetilise testimise võimalust munad osana in vitro viljastamine (IVF). Katsed viiakse läbi kromosoomid 1. ja 2. polaarkehast, mis moodustuvad 1. ja 2. küpsemisjaotuse ajal pärast isase sissetoomist sperma muna sisse. Meetodi eeliseks on see, et see ei ole de iure implantatsioonieelne geneetiline diagnoos (PGD), kuna uuring viiakse läbi enne naissoost ja isase tuuma sulandumist, nii et mõnes PGD keeluga riigis on lubatud eelväetamise geneetiline diagnoosimine.
Mis on eelviljastamise diagnostika?
Eelistamisdiagnostika pakub naise geneetilise testimise võimalust munad kontekstis in vitro viljastamine. Eelistamisdiagnostika loob võimaluse tuvastada naissoost ootsüüdi haploidse genoomi kromosoomide kõrvalekaldeid in vitro viljastamine (IVF). Eelkõige teatud arvulised kõrvalekalded kromosoomid (aneuploidia) ja teatud pärilikke haigusi põhjustavate geenide kõrvalekaldeid on võimalik tuvastada. Kui isane sperma viiakse munaraku tsütoplasmasse IVF ajal, see käivitab kõigepealt 1. ja 2. küpsemisjaotuse (meioos I ja II) munarakus. Mõlemal juhul kaks üleliigset rakku, polaarkehad, millel on ühesugune komplekt kromosoomid nagu munarakk ise, tekivad jagunemise tulemusena. Polaarkehad, mille keha tavaliselt lagundaks, eemaldatakse polaarkeha abil biopsia eest kromosoomianalüüs. Kuna eelkindluse diagnoosimine toimub alati polaarkehadel, nimetatakse seda protseduuri ka polaarkeha diagnoosimiseks (PCD). Uurimismeetodi eeliseks on see, et seda võidakse teha isegi mõnes riigis, kus implantatsioonieelne geneetiline diagnoosimine (PGD) on keelatud, kuna uuring viiakse läbi munaraku genoomile, kui sperma rakk ja munarakk pole veel sulandunud. Puuduseks on see, et uurida saab ainult ema genoomi kromosomaalseid kõrvalekaldeid. Munaraku tsütoplasmasse sisestatud spermatosoidide kromosoome selle meetodi abil tuvastada ei saa. Y-seotud haigusi ei saa tuvastada, kuna munaraku haploidne kromosoomikomplekt ei saa sisaldada Y-kromosoomi.
Funktsioon, mõju ja eesmärgid
Eelistamisdiagnostika geneetilise polaarkeha testimise vormis suudab tuvastada arvulisi kõrvalekaldeid (aneuploidiat) ema genoomi teatud kromosoomides, samuti translokatsioone, mille käigus kromosoomisegmendid on eraldatud ja vales kohas uuesti sisestatud. Lisaks X-seotud geen saab diagnoosida mutatsioone, mis on emalt päritud ja põhinevad ühe geeni mutatsioonil (monogeneetiline haigus). Selleks on vaja teada potentsiaalset pärilikku haigust, et sihtida konkreetset geen X-kromosoomis. Recessiivse pärilikkuse korral on tõenäosus, et polaarkeha X-kromosoom - ja seega ka viljastatud munaraku X-kromosoom - sisaldab vastava tervisliku alleeli geen. Protseduur ise hõlmab polaarkeha biopsia, kus munast eemaldatakse kaks haploidset polaarset keha ja seejärel kromosoomid FISH (fluorestsents in situ hübridisatsioon) testimine. The biopsia Polaarkehade testimine põhjustab katse läbiviivale laborile tohutu väljakutse, kuna polaarkehade kindlakstegemine ja eraldamine nõuab teatavat kogemust. FISH-testiprotseduuri jaoks on valitud kromosoomide jaoks saadaval nn DNA proovid, mis kombineeruvad vastavate haploidsete kromosoomidega, kuna neil on komplementaarne aminohappejärjestus. DNA sondid on tähistatud erinevate fluorestseeruvate värvidega, nii et kromosoome saab seejärel spetsiaalse tarkvara abil tuvastada ja automatiseeritud protseduuri abil loendada. Enamik kromosoomide kõrvalekaldeid, nagu aneuploidiad ja kromosoomi nihked kromosoomis, on surmavad. See tähendab, et IVF-i ajal ei moodustu sügootid ega embrüo lükatakse pärast siirdamine sisse emakasvõi on varajane või hiline aeg nurisünnitus. Alates naiste kromosomaalsete aberratsioonide sagedusest munad suureneb koos vanusega, viljakusdiagnostika oluline eesmärk on viljastatud munarakkude positiivne valik. Ainult viljastatud munad - nii palju kui võimalik, et puutumata genoomiga - siirdatakse emakas. Positiivse valiku eesmärk on suurendada rasedus pärast IVF-i ja vähendage tagasilükatud viljastatud munarakkude arvu ja raseduse katkemiste arvu. Teine eesmärk on välistada viljastatud munarakkude positiivse valiku abil pärilikud haigused, mis põhinevad uuesti siirdatud viljastatud munarakkudel kromosomaalsetest kõrvalekalletest või teatud geneetilistest defektidest. Tüüpilised pärilikud haigused, mida testiga saab välistada, hõlmavad järgmist tsüstiline fibroos, seljaaju lihaste atroofiaja sirprakk aneemia.
Riskid, kõrvaltoimed ja ohud
Eelistamisdiagnostika viiakse läbi väljaspool keha ja seetõttu ei kujuta see kaasatud naisele täiendavaid füüsilisi ohte. Väike füüsiline vigastuse ja nakkuse oht on seotud ainult munarakkude väljavõtmisega. Erinevalt PGD-st, mis hõlmab ka kromosoomi uurimist FISH-testiga, saab eelviljakusdiagnostikas uurida ainult ema kromosomaalset ja geneetilist materjali. See tähendab, et kui FISH-test on negatiivne ja kromosomaalseid ega geneetilisi kõrvalekaldeid ei diagnoosita, võivad vanematel olla liiga positiivsed ootused rasedus ja sellele järgnev sünd. Isapoolse genoomi kromosomaalseid kõrvalekaldeid ja võimalikke Y-kromosoomi anomaaliaid, mis võivad põhjustada sugulist pärilikku haigust, ei registreerita. Selles osas on eelviljastamise diagnostika isegi puudulikum kui PGD, kus kogu embrüo saab uurida blastula staadiumis. Kuid isegi negatiivse PGD korral ei saa välistada, et inimese genoomis esinevad geneetilised defektid embrüo, mis võib põhjustada halba arengut ja võib-olla viima pärast sündi puudele. FISH-test võib kunagi viidata ainult valitud kromosoomidele ja geenidele.
