Erütrotsüütide morfoloogia, faasikontrastmikroskoopia

Faasikontrastmikroskoopia on uroloogias ja nefroloogias (neerude uurimine) kasutatav diagnostiline protseduur tsütomorfoloogiliste elutähtsate proovide (elusrakkudega proov) uurimiseks ja hindamiseks hematuurias ja kuseteede diagnostikas. Selle meetodi silmapaistev tähtsus põhineb eelkõige diagnostikaga seotud võimalusel hinnata erütrotsüütide morfoloogiat (punase veri rakud), mis võib anda väärtuslikku teavet võimaliku hematuria (veri uriinis) või erütrotsütuuria (punased verelibled uriinis) päritolu kohta. Faasikontrastmikroskoopia uriini sete on ideaalne uriini erinevate vormide hindamiseks erütrotsüüdid.Sissejuhatus faasikontrastmikroskoopia tavapärases diagnostikas võib pidada oluliseks edasiminekuks, kuna see hõlbustab patognomooniliste uriini komponentide eristamist mittepatoloogilistest artefaktidest. Faasikontrastmikroskoopia on artefaktide diferentseerimise osas parem kui heleda välja mikroskoopia, mida kasutati kuni faasikontrastmikroskoopia kasutuselevõtuni. Kui esineb ebaselge või ebaselge järeldus, võib selle protseduuri rakendamine päästa vähem kasulikke meetmeid nagu radioloogiline või tsüstoskoopiline diagnoos (tsüstoskoopia) glomerulaarse hematuria korral (vt allpool), vähendades seeläbi kulusid ja säästes raviaega.

Näidustused (kasutusvaldkonnad)

Faasikontrastmikroskoopiat kasutatakse uroloogias ja nefroloogias erütrotsüütide morfoloogia uurimiseks:

• Tsütomorfoloogiliste eluliste proovide hindamine hematuria ja kuseteede diagnoosimisel. Näidustus:> 6-8 erütrotsüüdid/ l tuvastatav uriinis või positiivse triibu testis. Erütrotsüütide morfoloogia kontekstis tehakse glomerulaarse hematuria eristamine mitte-neerude erütrotsütuuriast düsmorfse (glomerulaarse) ja eumorfse tuvastamise teel erütrotsüüdid.
• Glomerulaarse päritoluga düsmorfset hematuria leitakse membraanse ja membraaniproliferatiivne glomerulonefriit, samuti IgA nefropaatia, fokaalne ja segmentaalne nefroskleroos ning luupuse nefriit. Glomerulaarse hematuuria korral surutakse erütrotsüüdid läbi kahjustatud glomerulaarsete kapillaaride basaalmembraanide, põhjustades kahjustusi. Mikroskoopiliselt tunneb ära düsmorfsed erütrotsüüdid, mida nimetatakse ka akantotsüütideks (= “Miki hiire kõrvadega” erütrotsüüdid).
• Eumorfset hematuria (postglomerulaarne hematuria) leitakse patsientidel, kellel on neeru tsüstid õõnsussüsteemi purunemisel, põis bilharzia, veri tupest (tupest) segunemine, vigastus pärast a põie kateeter, veri hüübimishäired jne.

Protseduur

Faasikontrastmikroskoopia põhimõte põhineb valguskiirte häirimisel mikroskoobi kiirteel, mis võimaldab saavutada värvimata rakkude suure kontrastsusega pildi. Faasikontrastmikroskoobi struktuur ja funktsioon:

• Rõngakujuline ava, kondensaator, rõngakujuline faasiplaat ja objektiiv on faasikontrastmikroskoobi funktsiooni jaoks eriti olulised. Sisestades rõngakujulise ava kondensaatorisse ja faasiplaadi objektiivi, põhjustatakse murdumata ja murdunud valguskiirte eraldamine. Sellest tulenev difraktsiooniga valguskiirte lainepikkuse viivitus kutsub esile faaside erinevuse, mis muudab optiliselt uuritava mikroskoopilise objekti struktuursed detailid ümbritsevast keskkonnast tumedamaks. Füüsiliselt faas vereliistakute teisendada faasi või tee erinevused amplituudi erinevusteks. Nende amplituudierinevuste tagajärjel ilmub objekti kujutis mikroskoobis objekti läbivate ja objektil difraktsioonis olevate otseste valguskiirte vastastikuse tühistamise või võimendamise teel.
• Seega on selle põhimõtte puuduseks asjaolu, et ideaalsed faasipreparaadid ei ole reegel, kuna amplituudiefektid on tavaliselt faasiefektide peal.
• Lähtudes struktuuride pildistamise amplituudi erinevustest, on olemasolevad rakustruktuurid kujutatud hallide toonidena, sõltuvalt nende enda optilistest Tihedus. Konstruktsioonide reprodutseerimise, õhukeste preparaatide ja faasi kasutamise parandamiseks vereliistakute on näidatud. Sõltuvalt eri etapi olemusest vereliistakute, on võimalik saavutada nii positiivseid kui ka negatiivseid faasikontraste, mille tulemuseks on huvipakkuvad objektid kas ümbritsevast tumedamad või heledamad.
• Faasikontrastmikroskoopias on oluline veel seda tähele panna nekroos (rakkude surm) võib valguse käes viibimise ja elutähtsate rakkude täiendava kahjustamise tõttu tekkida suhteliselt kiiresti. Selle kiire tulemusena nekroos Slaidide hindamine tuleb slaidide hindamiseks läbi viia ühe kuni kahe tunni jooksul kehtivus diagnostilise meetme Seega nõuab see elutähtsate isendite hindamise ajapiirang tavaliselt dokumenteerimist fotomikrograafia abil või vajadusel mikrokinematograafia abil. Fotomikrograaf on foto mikroskoopilisest pildist, mis on tehtud mikroskoobi külge kinnitatud kaameraga. Mikrokinematograafia kaudu on võimalus jäädvustada objekte mikroskoopilise vaatluse all liikuvatel piltidel.